行实验的必需步骤。虽然忙,但是每天都过得很充实的。病房有来来去去的病人需要她的帮助、安
,每次在手术台上都有新的
会让她不断积累着、
步着,而从嘉辉那里学习到的东西就更多了。这需要实验者注意观察细胞形态了,当本来挨得比较
密的细胞之间
现了细胞间隙,细胞变圆时,就是该终止胰酶消化时间了。这胰酶消化的时间就是关键中的关键了。一般是1到3分钟,这只是大概,不同的细胞系、甚至不同的胰酶在消化的时候,所需的时间都不一。
芳华每次都是将培养瓶从孵箱中拿
来在镜下观察。有时候遇上不同的细胞系,不清楚大概时间的时候,她还可能一分钟、一分半、两分钟…拿
来看好几次,试探最佳消化时间。最终,还是通过江澜的牵线搭桥,用原来买药的关系和国外药厂联系上了。他们对国内的病例资源也
兴趣,又知
**的实力,很快同意展开合作。当他判断消化时间还差
,他就放回孵箱,等一会儿再拿
来就差不多了。
得几次后,他往往时间拿
得更准确了,一次拿
来就是最佳时间。所以,他消化下来的细胞,只需
轻轻
打,就脱落下来,而且损伤极小,当然传代的细胞生长得就好。他觉得差不多的时候,就从孵箱里拿
培养瓶,对着自然光看一下瓶
。而芳华从嘉辉
上学习到的最重要的一
就是——细节是成败的关键。实质。每个学生都是靠老板的课题经费
实验,所以找个“财大气
的老板”很重要。经费充足,实验相对的就能
得漂亮。芳华很佩服,知
他对细节的把握能力,一定也是
了无数实验后才积累起来的。而这回,嘉辉都耐心地教会了芳华。慢慢,芳华养的细胞也同样个个长得“粉
粉
”的了。还有很多其他实验技巧,嘉辉也都手把手教会了芳华。芳华知
这一步的确很关键。消化过度则对细胞的活
损伤较大,消化不足则细胞难于从瓶
上
下,反复
打同样也会损伤细胞活
。纪主任自然算是财大气
的了,不过手下好几个学生,都是烧钱的主儿。要不是有实验室的依托,也养不起他们。现在又多了芳华这个烧钱的TMZ项目,纪主任最近都在为这件事想办法呢。而“消化”就是用胰酶消化
和细胞作用,使得细胞皱缩变圆,这时候轻摇培养
、或用

取培养
打内
,将细胞洗下来。最后将细胞悬
用

散后分瓶传代。药厂以临床疗效观察试验的名义批给了神经外科研究所一批足量的TMZ药
,这下芳华的实验有了切实的保障,而且整个脑外科的医生只要手里有合适病人,都会帮她充实临床病例数。芳华一开始纳闷,都是用的一样的培养瓶和培养
,放在同一个37摄氏度恒温的CO2孵箱,同一天传代,同样的换
,为什么自己养的细胞看上去状态就是差一些呢?嘉辉也不光是
实验这一项厉害。他看到实验室的电脑还在用win98系统,就帮着给装上刚
来的win2000系统。电脑或者实验室的某些仪
设备
了问题,他都能大概分析
原因,并动手解决或修理了。本来,芳华还觉得自己也能比较好地将细胞消化下来。但是,看了嘉辉的
作,芳华才觉得自己
得是差一些。跟着他,芳华可以尽情地问着所有对实验中不清楚的问题。慢慢地,原来自己东学一
、西摸一
的实验知识逐渐系统起来。很多知其然不知其所以然的地方,都豁然开朗了。芳华白天不在实验室的时候,嘉辉除了帮芳华
预实验、摸索实验条件外,也经常和宋老师等实验员老师以及
实验的几个博士硕士研究生们,讨论着各
实验方法和技术。这让他对国内的研究
平也有了更多的认识。这段时间,芳华很忙。白天忙着上手术和在病房
置病人,下午和晚上有空就到实验室,跟着嘉辉学习
实验。比如,同样是养细胞,他养的细胞就是比芳华养的
神。在倒置显微镜下看去,它们个个透明光亮,形态饱满。而芳华的细胞虽然是活着的,看生长速度似乎也不差什么,但是在镜下看,细胞质总是有
发暗、培养
中也似乎总有些渣滓似的。不说他每次在开关超净工作台时的细心,严格
无菌原则
作的严谨,也不说他的动作轻重得当,缓急有别。单是他观察细胞消化的时候,就熟练到了不用显微镜的程度。而大多数
瘤细胞都是
贴着培养瓶的内
生长的,在显微镜下看,球形的细胞就因贴
而呈现多角形。嘉辉也观察了芳华的
作后,说她的主要问题还是在传代的时候“消化”这一步骤掌握得不好。因为生长满瓶的细胞往往使透明的瓶
上形成雾状,变得半透明。嘉辉
观察就能
觉这半透明的细胞层的厚度,再轻轻摇晃一下瓶中的胰酶消化
,看瓶
细胞层的减少程度,就能判断
消化程度。一般他的判断和显微镜不差什么